Primer Premier Win10是一款非常专业的引物设计软件，该软件支持引物设计、限制性内切酶位点分析和DNA基元(motif)查找等功能，真正做到快速化和自动化操作流程，带来无与伦比的设计体验，并且该版本为破解版，内置破解补丁，免激活码即可永久免费进行使用。

【功能特色】

　　1、主要界面可分为序列编辑窗口（Genetank），引物设计窗口（Primer Design），酶切分析窗口（Restriction Sites）和纹基分析窗口（Motif）四大块

　　2、该软件就是用来进行引物设计的

　　3、可以简单地通过手动拖动鼠标以扩增出相应片段所需的引物

　　4、在手动的任何时候，下面显示各种参数的改变和可能的二聚体、异 二聚体、发夹结构等。也可以给定条件，让软件自动搜索引物，并将引物分析结果显示出来

　　5、进行这些操作非常简单

【破解教程】

　　1、下载软件压缩包文件，点击“PP624Installer.exe”根据提示完成原版安装即可

　　2、关闭软件，将crack文件夹下的patcher.jar文件复制到Premier 6安装根目录下…httpDwww.premierbiosoft.comP80DMIUpdaterDMPPDM624文件夹中。

　　默认目录为：C:Program FilesPrimer Premier 6.24

　　3、在开始菜单—运行中输入CMD，打开命题提示符窗口

　　4、用CD命令定位至目录：

　　cd C:Program FilesPrimer Premier 6.24httpDwww.premierbiosoft.comP80DMIUpdaterDMPPDM624

　　7、然后在光标后输入：java -jar patcher.jar ，回车即可破解成功

【使用技巧】

　　一、限制性酶切点分析及基元查找功能

　　1.其主要功能在主界面上一目了然。限制性酶切点分析及基元查找功能比较简单，点击该功能按钮后，选择相应的限制性内切酶或基元（如-10 序列，-35 序列等），按确定即可

　　2.常见的限制性内切酶和基元一般都可以找到,你还可以编辑或者添加新限制性内切酶或基元

　　二、引物设计

　　1.打开DNA序列后点击按钮primer，出现“search criteria”窗口，有多种参数可以调整

　　2.搜索目的（Seach For）有三种选项，PCR 引物（PCR Primers）、测序引物（Sequencing Primers）和杂交探针（Hybridization Probes）

　　3.搜索类型(Search Type)可选择分别或同时查找上、下游引物（Sense/Anti-sense Primer，或Both），或者成对查找（Pairs），或者分别以适合上、下游引物为主（Compatible with Sense/Anti-sense Primer）。另外还可改变选择区域（Search Ranges），引物长度（Primer Length），选择方式（Search Mode），参数选择（Search Parameters）等等

　　3.使用者可根据自己的需要设定各项参数。如果没有特殊要求，建议使用默认设置。然后按search，随之出现的Search Progress 窗口中显示Search Completed 时，再按OK，这时搜索结果以表格的形式出现，有三种显示方式，上游引物（Sense），下游引物(Anti-sense)，成对显示(Pairs)。默认显示为成对方式，并按优劣次序（Rating）排列，满分为100，即各指标基本都能达标

　　三、引物点击

　　1.点击其中一对引物，如第1#引物，并把上述窗口挪开或退出，显示“Peimer Premier”主窗口，所得结果分三部分，

　　2.模板及产物位置，中间是所选的上下游引物的一些性质，最下面是四种重要指标的分析，包括发夹结构（Hairpin），二聚体（Dimer），错误引发情况（False Priming），及上下游引物之间二聚体形成情况（Cross Dimer）

　　3.当所分析的引物有这四种结构的形成可能时，按钮由变成，点击该按钮，在左下角的窗口中就会出现该结构的形成情况

　　4.一对理想的引物应当不存在任何一种上述结构，因此最好的情况是最下面的分析栏没有，只有。值得注意的是中间一栏的末尾给出该引物的最佳退火温度

　　四、引物修饰编辑

　　1.在需要对引物进行修饰编辑时，如在5’端加入酶切位点，可点击，然后修改引物序列

　　2.若要回到搜索结果中，则点击按钮。如果要设计简并引物，只需根据源氨基酸序列的物种来源选择前述的八种遗传密码规则，反推至DNA 序列即可3.对简并引物的分析不需像一般引物那样严格

　　4.总之，“Premier”有优秀的引物自动搜索功能，同时可进行部分指标的分析，而且容易使用，是一个相当不错的软件